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采用 CRISPR/Cas9介導(dǎo)敲入技術(shù)構(gòu)建可量化生產(chǎn)蛋白質(zhì)的穩(wěn)定細(xì)胞系
從植物標(biāo)本中提取的DNA是高度片段化的，因此提取短DNA分子的提取步驟非常嚴(yán)格。動(dòng)物尸體DNA的提取方法和DNA文庫(kù)制備方法的改進(jìn)，已經(jīng)能夠有效提取小于50bp的DNA分子片段。因此，德國(guó)科學(xué)家Rafal M. Gutaker等將這些改進(jìn)方法應(yīng)用到植物標(biāo)本的DNA提取，并通過(guò)測(cè)序評(píng)估提取性能，該方法能夠?qū)NA片段長(zhǎng)度的分布進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)估。與使用十六烷基*基溴化銨（CTAB）提取相比，使用N-笨甲酰溴（PTB）緩沖液提取的中間片段長(zhǎng)度減少35%，改進(jìn)DNA與硅膜的結(jié)合條件可以額外減少10%。他們并未觀察到單鏈DNA長(zhǎng)度的進(jìn)一步降低和雙鏈DNA文庫(kù)的制備方法。這種方法能夠從植物標(biāo)本中提取超短分子，這將幫助開啟儲(chǔ)存在標(biāo)本室的遺傳信息。
原文：
Rafal M. Gutaker , Ella Reiter , Anja Furtwängler . Extraction of ultrashort DNA
molecules from herbarium specimens. BioTechniques 62:76-79 (February 2017).
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